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-86℃低溫冰箱在冰凍切片上的應(yīng)用

點擊次數(shù):3211    更新時間:2017-06-01

   隨著超低溫冰箱技術(shù)的不斷發(fā)展,超低溫冰箱在醫(yī)用領(lǐng)域也逐漸被廣泛應(yīng)用。例如-86℃低溫冰箱在冰凍切片上的應(yīng)用,那就是冰凍切片環(huán)節(jié)中速凍,以減少冰晶形成。

    免疫組織化學染色中zui常用的一種切片方法,就是冰凍切片。它zui突出的優(yōu)點,就是能夠較完好地保存多種抗原的免疫活性,尤其是細胞表面抗原,更應(yīng)采用冰凍切片。新鮮的組織及已固定的組織均可作冰凍切片。冰凍時,組織中水份易形成冰晶,往往影響抗原定位。一般認為冰晶少而大時,影響較小,冰晶小而多時,對組織結(jié)構(gòu)損害較大,在含水量較多的組織中上述現(xiàn)象更易發(fā)生。冰晶的大小與其生長速率成正比,而與成核率(形成速率)成反比,即冰晶形成的數(shù)量愈多則愈小,對組織結(jié)構(gòu)影響愈嚴重。因此,應(yīng)盡量降低冰晶的數(shù)量。Fish認為冰凍開始時,冰晶成核率較慢,以后逐漸增加,其臨界溫度為-33℃,從-30℃降至-43℃之間,成核率急劇增加達1018,然后再減慢。基于上述理論可采取以下措施減少冰晶的形成。

(1)速凍,使組織溫度驟降,縮短從-33℃到-43℃的時間,減少冰晶的形成。

其方法有二:

①干冰-丙酮(酒精)法:將150-200ml丙酮(酒精)裝入小保溫杯內(nèi),逐漸加入干冰,直至飽和呈粘稠狀,再加干冰不再昌泡時,溫度可達-70℃,用一小燒杯(50-100ml)內(nèi)裝異戊烷約50ml,再將燒杯緩慢置入干冰丙酮(純酒精)飽和液內(nèi),至異戊烷溫度達-70℃時即可使用。將組織(大小為1cm×0.8cm×0.5cm)投入異戊烷內(nèi)速凍30-60s后取出,或置恒冷箱內(nèi)以備切片,或置-86℃低溫冰箱內(nèi)貯存。

②液氮法:將組織塊平放于軟塑瓶蓋或特制小盒內(nèi)(直徑約2cm),如組織塊小可適量加OCT包埋劑浸沒組織,然后將特制小盒緩緩平放入盛有液氮的小杯內(nèi),當盒底部接觸液氮時即開始氣化沸騰,此時小盒保持原位切勿浸入液氮中,大約10-20s組織即迅速冰結(jié)成塊。取出組織冰塊立即置入-86℃低溫冰箱貯存?zhèn)溆?,或置入恒冷箱切片機冰凍切片。

-86℃低溫冰箱參數(shù):

產(chǎn)品系列

型號

容積L

溫度℃

內(nèi)尺寸:寬×深×高mm

外尺寸:寬×深×高mm

功率W

凈重Kg

-86℃
立式

TF-86-30-LA

30

-25~-65

270x265x400

470x490x1120

200

60

TF-86-60-LA

60

-25~-65

364x405x409

540x620x1115

240

75

TF-86-80-LA

80

-40~-86

380×410×500

620×660×1275

450

80

TF-86-158-LA

158

-40~-86

380×415×1020

620×660×1795

500

100

TF-86-328-LA

328

-40~-86

500×500×1300

760×765×1975

550

170

TF-86-400-LA

400

-40~-86

500×600×1300

760×865×1975

650

190

TF-86-550-LA

550

-40~-86

600×700×1300

860×965×1975

800

220

TF-86-638-LA

638

-40~-86

700×700×1300

960×965×1975

1000

250

TF-86-750-LA

750

-40~-86

800×700×1300

1060×965×1975

1200

280

TF-86-938-LA

938

-40~-86

1000×700×1300

1260×965×1975

1700

320

-86℃
臥式

TF-86-50-WA

50

-40~-86

440×350×315

650×560×880

350

60

TF-86-105-WA

105

-40~-86

410×460×550

1140×760×930

400

105

TF-86-200-WA

200

-40~-86

710×510×560

1390×760×930

500

160

TF-86-300-WA

300

-40~-86

1010×510×580

1690×760×930

600

180

TF-86-480-WA

480

-40~-86

1300×600×600

1990×860×975

700

240

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